Karakterizacija antitijela ključna je za razumijevanje imunološkog sustava i poboljšanje dijagnostike i terapije. Sadašnje primijenjene znanosti prvenstveno su specijalizirane za otkrivanje antigen-specifičnog imunoglobulina G (IgG) primjenom skupnih mjerenja u jednom kompleksu, kojima nedostaju podaci o različitim izotipovima i specifičnostima antitijela određene osobe.
Digitalni imunološki testovi koji se uglavnom temelje na amplifikaciji nukleinskih kiselina pokazali su vrhunsku učinkovitost dopuštajući detekciju pojedinačnih molekula u multipleks i osjetljivoj metodi. Na ovom istraživanju pokazat ćemo po prvi put test amplifikacije imuno-valjanja kruga (imuno-RCA) za multipleksnu detekciju tri izotipa specifičnih antitijela antitela (IgG, IgA i IgM) i njegovu integraciju s mikrograviranjem.
Da bismo potvrdili ovu metodu, koristili smo autoimunu bolest imunološki posredovanu trombotičku trombocitopeničnu purpuru (iTTP) jer je bolest manekenke s anti-ADAMTS13 autoantitijelima dijagnosticirana kao cilj molekula. Za uspostavu izotipova auto-antitijela anti-ADAMTS13, osmislili smo skup od tri različita konjugata antitijelo-oligonukleotid za identifikaciju i naknadnu amplifikaciju i vizualizaciju putem RCA.
Kako bismo potvrdili ovu metodu, prvo smo potvrdili specifičnost testa od> 88% i nisku granicu detekcije od 0. tri ng/mL unutar šiljastog pufera. Nakon toga smo proveli prikupljanje razrjeđenja uzorka iTTP plazme za multipleksnu detekciju tri izotipa s većom osjetljivošću u usporedbi s enzimskim imunosorbentom.
Na kraju, pokazali smo jednostaničnu evaluaciju ljudskih B stanica i hibridomskih stanica za detekciju izlučenih antitijela pomoću mikrograviranja i postigli otkrivanje 23. tri pg/mL protutijela izlučenih na sat. Ova metoda može pomoći u boljem razumijevanju distribucije izotipa antitijela i njihove uloge u brojnim bolestima.
Serum IGM teškim lancem pot izotipovi i lagani lanac varijante objavio u velikom škarpine (Epinephelus lanceolatus) kroz pročišćavanje proteina afinitet, masene spektrometrije i genoma sekvenciranje
Dva podizotipa teškog (H) lanca IgM (80 i 40 kDa) i dvije blage (L) varijante lanca (25 i 30 kDa) otkrivena su u serumu velike škarpine (Epinephelus lanceolatus), pročišćene taloženjem amonijevog sulfata afinitetnom kromatografijom na proteinu A.
Ova metodologija dala je 5,24 mg/mL IgM prekomjerne čistoće iz seruma kirnje, s učinkovitošću procijenjenom na 39,5% obnavljanja iz sirovog seruma. H i L lanci su prepoznati pomoću SDS-PAGE i masene spektrometrije (MS). Nanopore dugo čitanje sekvenciranja korišteno je za generiranje genomskog kontiga (MW768935), koji sadrži Cμ, Cδ lokuse, V H područja i H lanac Postajući član faze.
cDNA sekvenciranje Cμ transkripata (MW768933 i MW768934) korišteno je za osvjetljavanje genomskog kontiga i odlučivanje o egzonima i intronima odgovarajućeg lokusa. Mapiranje MS peptida otkrilo je da se 80 kDa H lanac sastoji od C H HL i V L gena. Puzotivni IgM podizotipi dodatno su prijavljeni u Epinephelus itajara i Epinephelus coioides. Prisutnost IgM podizotipa također bi mogla biti očuvana osobina među vrstama epinefelusa.
Tubulin- izotip ocjenjivanja dviju vrsta trava otpornih na dinitroanilin herbicide.
Biotipovi otporni na trifluralin Eleusine indica (L.) Gaertn. (guščja trava) i Setaria viridis (L.) Beauv. (neiskusni lisičji rep) pokazuju unakrsnu rezistenciju na različite dinitroanilin herbicide. Budući da se o mikrotubulama razmišlja o prvom ciljnom mjestu za dinitroanilin herbicide, istraživali smo je li razlika u osjetljivosti rezistentnih i ranjivih biotipova tih vrsta na modificirane tubulinske polipeptide.
Jednodimenzionalna i dvodimenzionalna elektroforeza od poliakrilamidnog gela pomiješana s imunoblotingom korištenjem dobro karakteriziranih anti-tubulinskih monoklonskih protutijela korištena je za pokazivanje domaćinstva izotipa tubulina u svakoj vrsti.
Sadnice E. indica pokazale su 4 izotipa β-tubulina i jedan izotip α-tubulina, dok su biljke S. viridis pokazale dva izotipa β-tubulina i dva α-tubulina. Usporedba osjetljivih i rezistentnih biotipova unutar svake vrste nije pokazala varijacije u elektroforetskim svojstvima brojnih izotipova tubulina. Ovi ishodi ne predstavljaju dokaz da je rezistencija na dinitroanilin herbicide povezana s modificiranim polipeptidom tubulina u ovim biotipima E. indica ili S. viridis.
Brojni izotipi aktina u usjevima : brojni geni za brojne uloge?
Biljni aktini kodirani su genskim domaćinstvom. Bez obzira na bitan značaj citoskeleta aktina za izgradnju i performanse biljaka, značaj izotipova aktina određene osobe i njihove posebne uloge u brojnim biljnim tkivima, pa čak i pojedinačnim stanicama relativno je slabo shvaćen.
Ova evaluacija sažima naše sadašnje informacije o kućanstvu gena biljnog aktina zajedno s njegovom evolucijom, izgradnjom gena i proteina te profilima ekspresije i regulacijom. Prvenstveno na temelju ovih pozadinskih podataka, evaluiramo analize mutanata i komplementarne analize u Arabidopsisu kako bismo privukli sve veću sliku preklapanja i posebnih uloga izotipova biljnih aktina. Na kraju, proučavamo hipoteze koje objašnjavaju mehanizme sposobnosti specifičnih za izotip.
Spektri vezanja izotipova šarana C3 nasuprot čistim ciljevima nepristrani su zbog specifičnosti vezanja njihovog tioestra.
Središnji element komplementa, C3, ima fleksibilan položaj u urođenoj imunološkoj zaštiti kralježnjaka i nekoliko beskralježnjaka. Značajan molekularni atribut ovog elementa je tioesterska web stranica unutar lanca koja omogućuje da se C3 kovalentno veže za svoj cilj.
Izviješteno je da se želja vezanja tioestera za hidroksilne ili amino timove prvenstveno ocrtava prisutnošću ili odsutnošću katalitičkog histidinskog ostatka na mjestu 1126 u ljudskom C3. U teleost-ovima je otkriven roman C3 (koji nije Njegova vrsta), zajedno s raširenom Njegovom vrstom C3. Ove različite izoforme C3 mogle bi predstavljati raznolikost unutar vezanja cilja koje se može pripisati potpuno različitim specifičnostima vezanja njihovih tioestera.
U okviru sadašnjeg istraživanja proučavamo pretpostavljenu povezanost katalitičkog histidina sa spektrom vezanja dva glavna C3 izotipa šarana u smjeru brojnih lutaka i čistih meta. Ishodi otkrivaju da ne-His vrsta C3, relativno nego njegova vrsta C3, ima širi raspon veznog spektra, bez obzira na to što je specifičnost vezanja njegovog tioestra ograničena na amino timove.
Poslije se pretpostavlja da spektri vezanja izotipova C3 obično nisu ocrtani specifičnošću vezanja tioestera, ali na njih dodatno utječu varijacije u molekularnim uzorcima povezanim s mikrobima koji aktiviraju komplement. Općenito, trenutne informacije ukazuju na to da ne-His vrsta C3 ima veliki položaj u odnosu na bakterijske infekcije u sustavu zaštite riba.
Ekspresija izotipova glutation-s-transferaze u odnosu na osjetljivost na doksorubicin i prognozu u bolesnika s bubrežnim karcinomom.
Uzorci su dobiveni iz tumora i susjednog bubrega u 29 oboljelih od bubrežnog karcinoma. Ekspresija alfa, pi i mu izoformi glutation-S-transferaze (GST) procijenjena je u formalinom pričvršćenim parafinskim dijelovima konvencionalnog i neoplastičnog bubrega, nakon objavljivanja odgovarajućih poliklonskih protutijela. čije je vezivanje prepoznato pristupom kosoj peroksidazi.
 Mouse IgG3 Isotype Control Purified |
|||
| 11-459-C025 | ExBio | 0.025 mg | EUR 88 |
Mouse IgG3 Isotype Control Purified |
|||
| 11-459-C100 | ExBio | 0.1 mg | EUR 136 |
) Mouse IgG3 Isotype Control (FITC) |
|||
| abx200588-100ug | Abbexa | 100 ug | EUR 398 |
|
|||
) Mouse IgG3 Isotype Control (PE) |
|||
| abx200589-50ug | Abbexa | 50 ug | EUR 606 |
|
|||
) Mouse IgG3 Isotype Control (APC) |
|||
| abx200590-100ug | Abbexa | 100 ug | EUR 732 |
|
|||
) Mouse IgG3 Isotype Control (PerCP) |
|||
| abx200591-100ug | Abbexa | 100 ug | EUR 732 |
|
|||
Mouse IgG3 Isotype Control (FITC) |
|||
| abx405036-100tests | Abbexa | 100 tests | EUR 425 |
|
|||
) Mouse IgG3 Isotype Control (RPE) |
|||
| abx405037-100tests | Abbexa | 100 tests | EUR 425 |
|
|||
 Mouse IgG3 Isotype control; Concentrate |
|||
| NG908C | Innovex | 1 ml | EUR 357 |
) Mouse IgG3-Biotin conjugate (isotype control) |
|||
| 20102-104-B | Alpha Diagnostics | 50 Tests | EUR 164 |
) Mouse IgG3-FITC conjugate (isotype control) |
|||
| 20102-104-F | Alpha Diagnostics | 50 tests | EUR 164 |
) Mouse IgG3-HRP conjugate (isotype control) |
|||
| 20102-104-HP | Alpha Diagnostics | 50 Tests | EUR 164 |
) Mouse IgG3-PE conjugate (isotype control) |
|||
| 20102-104-PE | Alpha Diagnostics | 50 Tests | EUR 202 |
) Mouse IgG3 Isotype Control (CF-Blue) |
|||
| abx200592-100ug | Abbexa | 100 ug | EUR 481 |
|
|||
) Mouse IgG3 Isotype Control (OC-515) |
|||
| abx200593-100ug | Abbexa | 100 ug | EUR 606 |
|
|||
) Mouse IgG3-PE-Cy5 conjugate (isotype control) |
|||
| 20102-104-PC5 | Alpha Diagnostics | 50 Tests | EUR 225 |
 Mouse IgG3 Isotype control; Ready-To-Use |
|||
| NG908 | Innovex | 7 ml | EUR 334 |
 Mouse IgG3 Control |
|||
| ICIGG3A-50 | ImmunoStep | 100 µg | EUR 648 |
Mouse IgG3 Control |
|||
| ICIGG3CFB-100 | ImmunoStep | 100 µg | EUR 388 |
Mouse IgG3 Control |
|||
| ICIGG3F-100 | ImmunoStep | 100 µg | EUR 323 |
Mouse IgG3 Control |
|||
| ICIGG3PE-50 | ImmunoStep | 50 µg | EUR 518 |
Mouse IgG3 Control |
|||
| ICIGG3PU-100 | ImmunoStep | 100 µg | EUR 323 |
 Mouse IgG3 Isotype Control DyLight® 488 |
|||
| L4-459-C100 | ExBio | 0.1 mg | EUR 213 |
 Mouse IgG3 Isotype Control DyLight® 650 |
|||
| L6-459-C100 | ExBio | 0.1 mg | EUR 213 |
 Mouse IgG2a Isotype Control |
|||
| 10R-I117d | Fitzgerald | 1 mg | EUR 553 |
|
Description: Purified Mouse IgG2a Isotype Control |
|||
 Mouse IgM Isotype Control |
|||
| abx020500-02mg | Abbexa | 0.2 mg | EUR 439 |
|
|||
 Mouse IgG1 Isotype Control |
|||
| abx200564-100ug | Abbexa | 100 ug | EUR 314 |
|
|||
Mouse IgG2a Isotype Control |
|||
| abx200572-100ug | Abbexa | 100 ug | EUR 314 |
|
|||
 Mouse IgG2b Isotype Control |
|||
| abx200580-100ug | Abbexa | 100 ug | EUR 314 |
|
|||
Mouse IgM Isotype Control |
|||
| abx200594-100ug | Abbexa | 100 ug | EUR 314 |
|
|||
Mouse IgG1 Isotype Control |
|||
| abx139001-01mg | Abbexa | 0.1 mg | EUR 314 |
|
|||
Mouse IgG1 Isotype Control |
|||
| abx139002-01mg | Abbexa | 0.1 mg | EUR 314 |
|
|||
Mouse IgM Isotype Control |
|||
| abx139003-01mg | Abbexa | 0.1 mg | EUR 314 |
|
|||
Mouse IgG2a Isotype Control |
|||
| abx139004-01mg | Abbexa | 0.1 mg | EUR 314 |
|
|||
Mouse IgG2a Isotype Control |
|||
| abx139005-01mg | Abbexa | 0.1 mg | EUR 314 |
|
|||
Mouse IgG2b Isotype Control |
|||
| abx139006-01mg | Abbexa | 0.1 mg | EUR 314 |
|
|||
Mouse IgG1 Isotype Control |
|||
| abx139008-01mg | Abbexa | 0.1 mg | EUR 314 |
|
|||
Mouse IgG2a Isotype Control |
|||
| abx139009-01mg | Abbexa | 0.1 mg | EUR 314 |
|
|||
Mouse IgG2b Isotype Control |
|||
| abx139011-01mg | Abbexa | 0.1 mg | EUR 314 |
|
|||
Mouse IgG1 Isotype Control |
|||
| abx405007-01mg | Abbexa | 0.1 mg | EUR 411 |
|
|||
Mouse IgG1 Isotype Control |
|||
| abx405009-05mg | Abbexa | 0.5 mg | EUR 690 |
|
|||
Mouse IgG1 Isotype Control |
|||
| abx405012-1mg | Abbexa | 1 mg | EUR 1080 |
|
|||
Mouse IgG2a Isotype Control |
|||
| abx405013-100tests | Abbexa | 100 tests | EUR 411 |
|
|||
Mouse IgG2a Isotype Control |
|||
| abx405015-05mg | Abbexa | 0.5 mg | EUR 690 |
|
|||
Mouse IgG2a Isotype Control |
|||
| abx405018-1mg | Abbexa | 1 mg | EUR 1107 |
|
|||
Mouse IgG2b Isotype Control |
|||
| abx405056-100tests | Abbexa | 100 tests | EUR 411 |
|
|||
Mouse IgG2b Isotype Control |
|||
| abx405061-1mg | Abbexa | 1 mg | EUR 1080 |
|
|||
Mouse IgM Isotype Control |
|||
| abx405062-100tests | Abbexa | 100 tests | EUR 411 |
|
|||
Mouse IgG1 Isotype Control |
|||
| abx405064-100tests | Abbexa | 100 tests | EUR 411 |
|
|||
Mouse IgG1 Isotype Control |
|||
| abx405067-05mg | Abbexa | 0.5 mg | EUR 829 |
|
|||
Mouse IgG2a Isotype Control |
|||
| abx405070-100tests | Abbexa | 100 tests | EUR 411 |
|
|||
Mouse IgG2a Isotype Control |
|||
| abx405073-05mg | Abbexa | 0.5 mg | EUR 829 |
|
|||
 Mouse IgG Isotype Control |
|||
| IC002-100ul | SAB | 100ul | EUR 122 |
 (Isotype control)) Rat IgG-Biotin conjugate (isotype control) (Isotype control) |
|||
| 20005-B | Alpha Diagnostics | 100 ug | EUR 164 |
 (Isotype control)) Rat IgG-FITC conjugate (isotype control) (Isotype control) |
|||
| 20005-F | Alpha Diagnostics | 100 ug | EUR 164 |
 (Isotype control)) Rat IgG-HRP conjugate (isotype control) (Isotype control) |
|||
| 20005-HP | Alpha Diagnostics | 100 ug | EUR 164 |
 (Isotype control)) Rat IgG-PE conjugate (isotype control) (Isotype control) |
|||
| 20005-PE | Alpha Diagnostics | 25 tests | EUR 202 |
 Rabbit Isotype Control |
|||
| abx200646-100ug | Abbexa | 100 ug | EUR 328 |
|
|||
Rabbit Isotype Control |
|||
| IMN-001 | ImmunoStep | 100 µg | EUR 199.5 |
 Mouse IgA isotype control, purified |
|||
| 20102-100 | Alpha Diagnostics | 100 ug | EUR 164 |
 Mouse IgG1 isotype control, purified |
|||
| 20102-101 | Alpha Diagnostics | 100 ug | EUR 141 |
 Mouse IgG2a isotype control, purified |
|||
| 20102-102 | Alpha Diagnostics | 100 ug | EUR 141 |
 Mouse IgG2b isotype control, purified |
|||
| 20102-103 | Alpha Diagnostics | 100 ug | EUR 141 |
 Mouse IgM isotype control, purified |
|||
| 20102-105 | Alpha Diagnostics | 100 ug | EUR 141 |
 Mouse IgE isotype control, purified |
|||
| 20102-106 | Alpha Diagnostics | 100 ug | EUR 164 |
 Mouse IgG2c isotype control, purified |
|||
| 20102-107 | Alpha Diagnostics | 100 ug | EUR 202 |
 Mouse IgG1 Isotype Control Purified |
|||
| 11-457-C025 | ExBio | 0.025 mg | EUR 88 |
Mouse IgG1 Isotype Control Purified |
|||
| 11-457-C100 | ExBio | 0.1 mg | EUR 136 |
 Mouse IgG2a Isotype Control Purified |
|||
| 11-458-C025 | ExBio | 0.025 mg | EUR 88 |
Mouse IgG2a Isotype Control Purified |
|||
| 11-458-C100 | ExBio | 0.1 mg | EUR 136 |
Mouse IgG1 Isotype Control Purified |
|||
| 11-632-C025 | ExBio | 0.025 mg | EUR 87 |
Mouse IgG1 Isotype Control Purified |
|||
| 11-632-C100 | ExBio | 0.1 mg | EUR 136 |
 Mouse IgG2b Isotype Control Purified |
|||
| 11-692-C025 | ExBio | 0.025 mg | EUR 88 |
Mouse IgG2b Isotype Control Purified |
|||
| 11-692-C100 | ExBio | 0.1 mg | EUR 136 |
Mouse IgG2a Isotype Control Purified |
|||
| 11-724-C025 | ExBio | 0.025 mg | EUR 88 |
Mouse IgG2a Isotype Control Purified |
|||
| 11-724-C100 | ExBio | 0.1 mg | EUR 136 |
Mouse IgG2b Isotype Control Purified |
|||
| 11-801-C025 | ExBio | 0.025 mg | EUR 88 |
Mouse IgG2b Isotype Control Purified |
|||
| 11-801-C100 | ExBio | 0.1 mg | EUR 136 |
 Mouse IgM Isotype Control Purified |
|||
| 11-803-C025 | ExBio | 0.025 mg | EUR 87 |
Mouse IgM Isotype Control Purified |
|||
| 11-803-C100 | ExBio | 0.1 mg | EUR 136 |
 Mouse IgG1 Isotype Control APC |
|||
| 1A-632-C025 | ExBio | 0.025 mg | EUR 122 |
Mouse IgG1 Isotype Control APC |
|||
| 1A-632-C100 | ExBio | 0.1 mg | EUR 204 |
 Mouse IgG2b Isotype Control APC |
|||
| 1A-692-C025 | ExBio | 0.025 mg | EUR 122 |
Mouse IgG2b Isotype Control APC |
|||
| 1A-692-C100 | ExBio | 0.1 mg | EUR 204 |
 Mouse IgG2a Isotype Control APC |
|||
| 1A-724-C025 | ExBio | 0.025 mg | EUR 122 |
Mouse IgG2a Isotype Control APC |
|||
| 1A-724-C100 | ExBio | 0.1 mg | EUR 204 |
 Mouse IgG1 Isotype Control Biotin |
|||
| 1B-632-C025 | ExBio | 0.025 mg | EUR 108 |
Mouse IgG1 Isotype Control Biotin |
|||
| 1B-632-C100 | ExBio | 0.1 mg | EUR 177 |
 Mouse IgG2b Isotype Control Biotin |
|||
| 1B-692-C025 | ExBio | 0.025 mg | EUR 108 |
Mouse IgG2b Isotype Control Biotin |
|||
| 1B-692-C100 | ExBio | 0.1 mg | EUR 177 |
 Mouse IgG2a Isotype Control Biotin |
|||
| 1B-724-C025 | ExBio | 0.025 mg | EUR 108 |
Mouse IgG2a Isotype Control Biotin |
|||
| 1B-724-C100 | ExBio | 0.1 mg | EUR 177 |
 Mouse IgG1 Isotype Control FITC |
|||
| 1F-632-C025 | ExBio | 0.025 mg | EUR 108 |
Mouse IgG1 Isotype Control FITC |
|||
| 1F-632-C100 | ExBio | 0.1 mg | EUR 177 |
 Mouse IgG2b Isotype Control FITC |
|||
| 1F-692-C025 | ExBio | 0.025 mg | EUR 108 |
Mouse IgG2b Isotype Control FITC |
|||
| 1F-692-C100 | ExBio | 0.1 mg | EUR 177 |
Ekspresija alfa, pi i mu GST-a u svakom uzorku tumora bila je u suprotnosti s in vitro osjetljivošću tumorskih stanica na doksorubicin, što je odlučeno inhibicijom lijeka unosa [Se-75] selenometionina odgovarajućim tumorskim stanicama u tradiciji. Ekspresija pi GST bila je povezana s rezistencijom tumorskih stanica na doksorubicin. Stupanj alfa, pi i mu GST nije bio povezan s preživljavanjem zahvaćene osobe.
